一、品牌概述

ProFoldin 是一家專注于蛋白質(zhì)科學領(lǐng)域研究與工具開發(fā)的美國生物公司，總部位于馬薩諸塞州。公司長期圍繞蛋白質(zhì)的物理化學性質(zhì)，開發(fā)一系列用于蛋白質(zhì)折疊、膜蛋白提取、分子結(jié)合測定、高通量檢測及藥物靶酶分析的研究試劑與科研服務(wù)。

ProFoldin 的產(chǎn)品被多國大學、研究機構(gòu)、生物技術(shù)公司、制藥研發(fā)部門及研究型醫(yī)院采用，應(yīng)用于生命科學研究與藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域。其蛋白折疊柱、膜蛋白提取試劑等產(chǎn)品在科研工作者中形成了較為廣泛的使用基礎(chǔ)，相關(guān)應(yīng)用文獻已見諸多種學術(shù)期刊。

除標準化試劑外，ProFoldin 還提供定制化酶檢測開發(fā)、脂質(zhì)體藥物遞送系統(tǒng)研發(fā)等服務(wù)，覆蓋了從基礎(chǔ)研究到藥物篩選的部分關(guān)鍵實驗環(huán)節(jié)。在中國區(qū)域，ProFoldin 授權(quán) 上海起發(fā)實驗試劑有限公司 作為代理商，為國內(nèi)科研用戶提供產(chǎn)品供應(yīng)與技術(shù)支持。

?? 下圖為上海起發(fā)實驗試劑公司作為美國ProFoldin授權(quán)代理商的授權(quán)書

二、核心優(yōu)勢

▎聚焦蛋白質(zhì)研究的專業(yè)定位

ProFoldin 長期專注于蛋白質(zhì)折疊、膜蛋白提取、蛋白復(fù)性等細分方向，產(chǎn)品圍繞這些環(huán)節(jié)的共性難點進行設(shè)計，在實驗流程的針對性上較為明確。

▎多樣化的條件篩選體系

無論是蛋白折疊還是膜蛋白提取，ProFoldin 均提供包含多種去污劑、緩沖體系和折疊條件的篩選試劑盒，便于研究者對不同蛋白樣本進行條件優(yōu)化，減少反復(fù)摸索的時間。

▎從篩選到制備的完整方案

產(chǎn)品體系覆蓋小規(guī)模篩選、中規(guī)模制備到大規(guī)模制備，研究者可依據(jù)實驗階段選用相應(yīng)規(guī)格，實驗放大過程較為連貫。

▎兼容高通量藥物篩選

部分檢測試劑與96孔板產(chǎn)品適用于高通量篩選（HTS）場景，可服務(wù)于藥物靶點的活性驗證與化合物篩選。

▎產(chǎn)品類別較為豐富

除蛋白折疊與膜蛋白提取外，產(chǎn)品線還涵蓋蛋白除鹽、聚合酶、熒光染料、分子結(jié)合測定工具、藥物靶酶檢測服務(wù)等，可滿足多種實驗需求。

三、熱門產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品一：非膜蛋白折疊篩選與制備試劑盒（離心柱式）

? 品名

非膜蛋白折疊篩選試劑盒（Spin-Column Protein Folding Screen Kit）及配套的大規(guī)格制備柱組（Large-Scale Preparative Protein Folding Column Set）。

? 產(chǎn)品特點

• 采用離心柱形式，操作簡便，與常規(guī)臺式離心機兼容

• 篩選試劑盒包含10根折疊柱，分別對應(yīng)10種經(jīng)過優(yōu)化的折疊條件，涵蓋促進二硫鍵形成的條件與還原條件

• 制備柱組適用于變性蛋白的大規(guī)模折疊，單組可用于10至20毫克變性蛋白的制備

• 適用于從包涵體中制備具有活性的蛋白質(zhì)

? 存儲條件

• 試劑與柱子建議于2至8攝氏度冷藏保存

• 部分試劑在長期儲存后可能出現(xiàn)沉淀，使用前可恢復(fù)至室溫溶解，再冷卻至4攝氏度后使用

• 避免反復(fù)凍融，具體以產(chǎn)品說明書為準

? 工作原理

本產(chǎn)品通過離心柱內(nèi)特定緩沖體系，將鹽酸胍或尿素溶解的變性蛋白緩慢轉(zhuǎn)移至有利于天然構(gòu)象形成的環(huán)境中，借助不同氧化還原條件與緩沖組成，促進蛋白質(zhì)重新折疊并形成正確構(gòu)象。10根篩選柱對應(yīng)10種不同條件，便于對比篩選出目標蛋白的最適折疊環(huán)境。

? 使用方法概述

1. 包涵體經(jīng)含鹽酸胍（或尿素）與DTT的緩沖液溶解、離心后取上清

2. 將溶解后的包涵體與試劑盒中的溶液A混合，制備上樣樣品

3. 離心平衡柱子，棄去柱底封口與蓋帽，轉(zhuǎn)移至干凈的離心管中

4. 向每根柱子上樣25微升樣品，離心收集流出液

5. 流出液于4攝氏度孵育數(shù)小時，再加入溶液B繼續(xù)孵育

6. 高速離心后取上清進行SDS-PAGE或活性檢測，篩選優(yōu)秀條件

7. 確定優(yōu)秀柱號后，使用對應(yīng)編號的大規(guī)格制備柱組進行放大折疊

產(chǎn)品二：膜蛋白提取試劑盒（Membrane Protein Extraction Kit）

? 品名

膜蛋白提取試劑盒（MPE01-12S）、膜蛋白提取試劑盒升級版（MPE01-12P）及單組分膜蛋白提取溶液（MPE01至MPE12）。

? 產(chǎn)品特點

• 提供12種不同去污劑與合成脂質(zhì)類似物組成的提取溶液，涵蓋烷基糖苷、酰基-N-甲基葡糖酰胺、膽汁酸鹽、烷基胺氧化物、烷基聚乙烯、兩性去污劑、磷脂堿衍生物等多種類型

• 三種規(guī)格可選：微量制備（約1.5毫克膜蛋白）、中量制備（約16毫克膜蛋白）、單組分大規(guī)模制備（約130毫克膜蛋白）

• 適用于真核與原核細胞膜蛋白的提取與穩(wěn)定

? 存儲條件

• 各提取溶液建議于2至8攝氏度冷藏保存

• 長期儲存可參考零下20攝氏度冷凍保存，避免反復(fù)凍融

• 使用前可根據(jù)需要加入適量蛋白酶抑制劑

? 工作原理

膜蛋白嵌于脂雙層中，不同膜蛋白對去污劑的種類與濃度需求差異較大。本產(chǎn)品通過12種不同性質(zhì)的去污劑與脂質(zhì)類似物，分別破壞脂雙層并與目標膜蛋白結(jié)合，使其從膜中溶出并保持可溶與穩(wěn)定狀態(tài)，便于后續(xù)的純化與功能研究。

? 使用方法概述

1. 從細胞裂解液中通過高速離心分離細胞膜，洗滌后保存于零下80攝氏度

2. 取含約3毫克膜蛋白的膜樣品，高速離心后棄上清

3. 向每份膜沉淀中加入100微升不同編號的提取溶液，渦旋充分懸浮

4. 在適宜溫度（如0攝氏度、室溫或37攝氏度）孵育2小時或過夜

5. 離心后取上清，通過SDS-PAGE與活性檢測分析各條件下的提取效果

6. 根據(jù)結(jié)果選擇優(yōu)秀溶液編號，使用中量或大規(guī)模規(guī)格進行制備提取

產(chǎn)品三：96孔蛋白折疊板（96-Well Protein Folding Plate）

? 品名

96孔蛋白折疊板（96-Well Protein Folding Plate）。

? 產(chǎn)品特點

• 單塊母板包含96種不同折疊條件，涵蓋不同pH、鹽濃度與添加劑組合

• 每塊母板每孔含500微升溶液，可支持多次不同蛋白的折疊篩選

• 搭配包涵體溶解液與中和液使用，流程緊湊

• 適用于多種蛋白質(zhì)的折疊條件并行篩選

? 存儲條件

• 母板與試劑建議于2至8攝氏度冷藏保存

• 包涵體溶解液等組分按說明書要求儲存，避免反復(fù)凍融

• 操作過程全程保持4攝氏度低溫環(huán)境

? 工作原理

產(chǎn)品通過96孔板并行提供96種不同理化條件的折疊環(huán)境，將少量變性蛋白稀釋入各孔后，蛋白在不同pH、鹽濃度與添加劑組合下嘗試復(fù)性，研究者可通過溶解度檢測、SDS-PAGE或活性測定快速鎖定較優(yōu)條件，再放大至制備規(guī)模。

? 使用方法概述

1. 準備濃度約10毫克每毫升的包涵體溶解液

2. 將母板離心使溶液沉底，向透明96孔板中每孔轉(zhuǎn)移100微升溶液，4攝氏度預(yù)冷

3. 向每孔加入2微升蛋白樣品，4攝氏度孵育約4小時

4. 每孔加入8微升中和液，4攝氏度孵育過夜

5. 離心后取上清進行溶解度檢測（如405納米光散射）或SDS-PAGE、活性檢測

6. 確定優(yōu)秀孔位后，可訂購對應(yīng)條件的制備規(guī)格溶液進行放大

四、可解決的實驗問題

? 包涵體蛋白難以復(fù)性

重組蛋白在原核表達中常形成無活性的包涵體。ProFoldin 的蛋白折疊柱與96孔折疊板提供多種氧化還原與緩沖條件，幫助研究者篩選能使目標蛋白正確折疊、恢復(fù)活性的環(huán)境。

? 膜蛋白提取效率低

膜蛋白疏水性強，常規(guī)方法溶出率有限。12種不同去污劑體系可覆蓋多種膜蛋白類型，提高目標蛋白的溶出與穩(wěn)定效率。

? 膜蛋白提取后失去活性

部分去污劑在溶解膜蛋白的同時會破壞其構(gòu)象。ProFoldin 提取溶液中包含可形成膠束或雙膠束環(huán)境的去污劑與合成脂質(zhì)類似物，有助于在溶解的同時維持膜蛋白的天然構(gòu)象與功能。

? 折疊條件摸索耗時長

傳統(tǒng)方法需逐個配制緩沖液。篩選試劑盒與96孔板將多種條件預(yù)制化，可并行比較，縮短條件優(yōu)化周期。

? 從小規(guī)模篩選到大規(guī)模制備的銜接不暢

ProFoldin 提供從微量篩選、中量制備到大規(guī)模制備的完整規(guī)格體系，放大過程較為連貫，減少方法轉(zhuǎn)移帶來的條件偏差。

五、購買產(chǎn)品的常見疑問與解答

Q1：ProFoldin 的產(chǎn)品在中國如何購買？

A：ProFoldin 在中國區(qū)域的代理商為 上海起發(fā)實驗試劑有限公司，可通過該公司咨詢產(chǎn)品信息與訂購事宜。

Q2：如何判斷應(yīng)選用膜蛋白還是非膜蛋白折疊產(chǎn)品？

A：依據(jù)目標蛋白是否為膜蛋白進行判斷。膜蛋白（如受體、離子通道）建議使用膜蛋白折疊柱或膜蛋白提取試劑盒；可溶性的胞漿蛋白或分泌蛋白一般使用非膜蛋白折疊柱即可。

Q3：篩選試劑盒中的多根柱子或多種溶液分別代表什么？

A：每根折疊柱或每種提取溶液對應(yīng)一種特定的折疊或提取條件，區(qū)別主要在于緩沖液組成、氧化還原狀態(tài)、去污劑種類等。通過并行對比，可直觀判斷哪種條件更適合目標蛋白。

Q4：折疊或提取后的樣品如何驗證是否成功？

A：常用方法包括SDS-PAGE觀察可溶性條帶、光散射檢測沉淀、以及針對目標蛋白的催化或結(jié)合活性測定。96孔板也可直接以405納米吸光度粗略評估溶解度。

Q5：試劑出現(xiàn)沉淀是否正常？

A：部分試劑在長期冷藏后可能出現(xiàn)沉淀，屬于可恢復(fù)現(xiàn)象。可按說明書將其恢復(fù)至室溫溶解、混勻后，再冷卻至4攝氏度使用。具體以產(chǎn)品說明書為準。

Q6：產(chǎn)品是否適用于藥物篩選？

A：ProFoldin 的部分檢測試劑與96孔板產(chǎn)品適用于高通量篩選場景，可用于藥物靶點的活性檢測與化合物篩選，具體適用場景可參考產(chǎn)品說明或咨詢代理商。

Q7：訂購時是否需要額外支付運輸相關(guān)費用？

A：由于部分試劑對運輸條件有一定要求，為保證產(chǎn)品質(zhì)量與性能，訂購時通常會涉及相應(yīng)的運輸費用，具體金額可咨詢 上海起發(fā)實驗試劑有限公司。

Q8：能否提供定制化的檢測開發(fā)服務(wù)？

A：可以。ProFoldin 提供定制化酶檢測開發(fā)、化合物測試及脂質(zhì)體藥物配方等服務(wù)，有相關(guān)需求可通過代理商進行溝通。

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更多產(chǎn)品信息，請聯(lián)系美國ProFoldin授權(quán)代理商：上海起發(fā)實驗試劑有限公司

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（注：本文內(nèi)容基于品牌公開資料及行業(yè)常規(guī)信息整理，具體以品牌信息文檔為準。）

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